本发明公开了一种云南烟叶与红茶复合提取物及其制备方法、烟丝和卷烟，属于烟用香料技术领域。制备方法包括：将粉碎后的云南烟叶和粉碎后的红茶按照质量比为(70～95)：(30～5)的比例混合；分别称量果胶酶、蛋白酶和纤维素酶，获得复合酶溶液；将提取原料与复合酶溶液混合，酶解2～5h；加入乙醇溶液终止酶解反应，之后将乙醇稀释至质量浓度为50～80％，获得提取原料；在40～60℃下进行提取，之后减压浓缩，获得云南烟叶与红茶复合提取物。通过复配提取，弥补了云南烟叶在香气方面的不足，增加了清甜香气，且相比于两种原料单独提取之后再混合添加的技术方案，两种原料复配提取得到的提取物香气更加协调，更加丰富饱满。