本发明提供了一种微环境适应性活性氧炸弹水凝胶微球及其制备与应用，属于生物材料技术领域。本发明的制备方法包括：(1)制备介孔聚多巴胺与羟基氧化铁复合纳米颗粒；(2)将葡萄糖氧化酶溶液与复合纳米颗粒混合，得到负载葡萄糖氧化酶的复合纳米颗粒；(3)将负载葡萄糖氧化酶的复合纳米颗粒进行生物矿化，得到磷酸钙包覆的葡萄糖氧化酶复合纳米颗粒；(4)制备含葡萄糖的HAMA微球，然后与复合纳米颗粒混合，即得微环境适应性活性氧炸弹水凝胶微球。本发明的微环境适应性活性氧炸弹水凝胶微球能够持续稳定高效产生·OH，具有病灶低pH响应性，定向对细菌细胞膜进行ROS攻击，使持留菌的细菌细胞膜破裂并高效诱导细菌死亡。