本申请提供一种用于结肠肿瘤早期检测β‑半乳糖苷酶的红光发射探针使用方法和应用，涉及分析化学技术领域。检测β‑半乳糖苷酶的红光发射探针，其结构式如下所示：#imgabs0#本申请还提供一种检测β‑半乳糖苷酶的红光发射探针的使用方法。检测β‑半乳糖苷酶的红光发射探针的应用，用于定量分析β‑半乳糖苷酶。检测β‑半乳糖苷酶的红光发射探针的应用，用于辅助早期诊断结肠肿瘤或者用于制备能够辅助早期诊断结肠肿瘤的试剂。本申请提供的检测β‑半乳糖苷酶的红光发射探针，结合喹喔啉基团和刚性五元环，构建新型香豆素衍生物，通过连接β‑半乳糖苷酶识别位点，能够快速实现β‑半乳糖苷酶的检测。