本发明涉及一种木质素基可见光响应释放一氧化氮的纳米抗菌剂及其制备方法和应用。本发明方法通过将碱木质素AL，一氧化氮供体BNN6和磷脂PEG衍生物DSPE‑PEG2000的四氢呋喃溶液加入到去离子水当中，经超声、离心、旋蒸浓缩和冻干得到AL‑BNN6‑PEG2000复合纳米抗菌剂。本发明的AL‑BNN6‑PEG2000复合纳米粒子在可见光作用下可快速释放NO，对耐药性金黄色葡萄球菌具有显著的杀菌效果。本发明对于增加BNN6在水溶液中的分散性，使BNN6响应光谱移至可见光范围，获得安全高效的NO抗菌材料，提高木质素的超高价值利用具有重要的现实意义。