本发明提供了一种川木通中落叶松树脂醇B的检测方法，包括如下步骤：取落叶松树脂醇B对照品，制备对照品溶液；取川木通样品，制备供试品溶液；分别将所述对照品溶液与所述供试品溶液进行超高效液相色谱与质谱联用测定；其中，所述超高效液相色谱测定的条件包括：流动相A为乙腈，流动相B为甲酸水溶液；所述流动相A与所述流动相B的体积比为(11～13):(87～89)。该检测方法能够对川木通样品中的落叶松树脂醇B化合物进行定性与定量分析，并且具有专属性与稳定性强、精密度与准确度好以及重复性与耐用性好的优点。