本发明属于植物中残留抗生素提取和检测技术领域，具体涉及一种提取植物组织中磺胺类抗生素的方法及其应用。本发明将植物组织和pH值为3的缓冲液在黑暗条件下混合，使植物组织处于酸性环境中，能较好地保护样品中的磺胺类抗生素，降低磺胺类抗生素的自然降解速率；在提取环节以酸化乙腈作为唯一的提取剂，使更多的磺胺类化合物从植物组织溶解到酸化乙腈中；通过添加EDTA能够螯合植物组织、提取液中的金属离子，减少离子的干扰效应。本申请简化了提取剂的种类和数量，只需提取一次，即可达到高效提取植物组织中磺胺类抗生素的效果。并且通过净化剂的最优配比进行净化吸附，使样品回收率受杂质的影响降至最低，大大简化了操作步骤、节省成本。