本发明公开了一种通过生物酶法转化别鹅去氧胆酸的工艺方法，包括，制备转化酶，进行酶转化反应；将酶转化反应的反应液先煮沸，再冷却，后离心；将离心后的反应液先酸化，再过滤洗涤；将洗涤后的反应液浓缩干燥粉碎；制备液相分离及干燥，得淡黄色粉末的产品。本发明利用别鹅去氧胆酸为原料，通过转化酶的生产工艺生产出转化酶完成转化反应，避开纯化学工艺方法中必须在强碱、低温状态下长时间反应，变为在温合条件下反应，简化工艺,降低了反应的苛刻条件，降低了能耗,节约了成本、同时减少了对环境的不利影响，找到了一条生物酶法的转化方法。