本发明公开了用于腺病毒包装的pTYAd系列载体，属于分子生物学中的基因工程和分子生物学技术领域，通过以下步骤获得：对抽提好的腺病毒质粒pAD‑U6‑shRNA‑PGK‑PuroR以XbaI和SalI进行线性化，然后进行跑胶并进行胶回收，得到线性化载体pTYAd‑linear，之后在线性化载体pTYAd‑linear上引入多克隆位点序列MCS1，得到腺病毒载体pTYAd‑MCS1，之后引入MCS2序列，得到腺病毒载体pTYAd‑MCS1+MCS2，本发明通过基因序列合成，重组载体构建等步骤制得一系列腺病毒载体，可以应用于各种类型的腺病毒载体改造，对于提高腺病毒载体改造的效率具有十分重要的意义。