一种利用高效液相色谱仪检测微量血中未结合胆红素浓度及分型的方法，属于血液检测技术领域。其方法如下：1、称取未结合胆红素标准品，用吹过氮气的二甲基亚砜溶解配制成未结合胆红素标准品溶液；2、将步骤1所得标准品溶液注入高效液相色谱仪并检测，以3％‑6％二正辛胺乙酸盐甲醇水溶液作为流动相进行等度洗脱，并记录色谱图；3、将步骤1所得标准品进行梯度稀释，配制成不同浓度的标准品溶液，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线；4、将未经处理的血清样品直接注入高效液相色谱仪，进行等度洗脱，并记录色谱图，根据标准曲线及所得峰面积对血清中未结合胆红素进行定量。本发明可实现血清中未结合胆红素的定性分析，采血微量，方便快捷，检测结果准确。