具有增强的热稳定性的T7-RNA聚合酶突变体
摘要:
本发明描述了一种从大肠杆菌噬菌体T7‑RNA聚合酶突变体中选择RNA聚合酶的单一策略,该突变体具有增强的热稳定性。本发明通过引入突变,提供了改良的T7‑RNA聚合酶突变体。这种突变体是将511、798、827这三个位置的氨基酸替换为半胱氨酸,在T7‑RNA聚合酶的第467位和511位,第798位和827位之间引入二硫键,能够增强T7‑RNA聚合酶的热稳定性及储存稳定性。本发明的T7‑RNA聚合酶突变体在45℃条件下仍保留较强的转录活性,可以适用于较高温度条件下RNA的生产,在临床医药、流感疫苗、肿瘤疫苗、生物制药等领域都能发挥重要作用。本发明的T7‑RNA聚合酶突变体在维持高效转录的同时,能够增强T7‑RNA聚合酶的热稳定性,同时有益于低温下酶的保存。
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