本申请涉及分析化学技术领域，具体公开了一种左氧氟沙星制剂中相关物质的检测方法。该检测方法包括以下步骤：配制样品溶液、将所述样品溶液注入液相色谱仪中，采用十八烷基硅烷键合硅胶填料的色谱柱及流动相梯度洗脱方法进行分离检测；所述分离检测过程中，柱温为58‑62℃。本申请提供的左氧氟沙星制剂中相关物质的检测方法能够快速、准确地同时检测左氧氟沙星制剂中的杂质A、杂质B、杂质E、杂质F、杂质G和杂质J，并且检测的专属性强、灵敏度高、分离度好；将上述检测方法用于左氧氟沙星制剂生产中，能够实现制剂质量的有效把控。