本申请提供一种乙酰化小分子透明质酸钠及其制备方法和应用，涉及化妆品技术领域。该制备方法将小分子透明质酸钠与乙酰氯在甲酰胺溶液中反应，使用的试剂为非受管控试剂，制备安全，利于工业化生产，并且可在无催化剂条件下，较短时间内完成乙酰化反应，同时甲酰胺可与反应产生地盐酸结合，起到缚酸剂的作用，减少了盐酸对乙酰化小分子透明质酸钠的糖苷键的破坏；反应得到的乙酰化小分子透明质酸钠采用离子树脂进行纯化，无需碱液调节pH，从而避免了碱液加入过程中可能引起地乙酰化小分子透明质酸钠的乙酰基脱落风险，保证乙酰化小分子透明质酸钠的高乙酰基取代度，高收率。