本发明提供了一种用于病毒培养、制备的羊源永生化细胞系。通过将hTERT基因导入羊胚胎鼻甲骨细胞(OFTu)，构建成为永生化OFTu细胞系。所述细胞系可用于扩增制备羊传染性脓疱病毒(ORFV)、绵羊痘病毒(SPV)、山羊痘病毒(GPV)、疙瘩皮肤病病毒(LSDV)中的至少一种。本发明提供的羊源永生化细胞系，具有较好的应用、转化前景：(1)细胞系可以持续传代，增殖性能稳定；(2)细胞系对羊传染性脓疱病病毒敏感，感染后收获病毒滴度较高，且病毒形态稳定。同时也对上述其他病毒具有较好的敏感性。使用上述细胞系制备病毒可以降低生产成本、减少批间差异，为获得高质量的疫苗提供保障。