提供了一种嘌呤霉素连接子及其在体外核酸展示肽合成中的应用。所述嘌呤霉素连接子为含修饰无分支的单链DNA，该单链DNA包括第一段核苷酸和第二段核苷酸；所述第一段核苷酸的5'端和所述第二段核苷酸的5'端相连接形成包含两个3’末端的连接体结构；所述第一段核苷酸的3’端修饰有嘌呤霉素；所述第二段核苷酸按照5’至3’的顺序包括mRNA连接位点和逆转录位点。所述嘌呤霉素连接子合成方法简单，效率高达53％，极大地提高了关键原料获取的效率，进一步提高系统效率及缩减了cDNA‑蛋白的合成成本。