本发明公开了一种构建生物正交反应基纸器件的方法及其在单胺氧化酶检测上的应用。通过在纸基表面用W1化合物进行修改，修饰后的纸基器件带有1,2,4,5‑四嗪衍生物结构，原有1,2,4,5‑四嗪结构基于光致电子转移机制淬灭了原本的荧光。当特异性结合的蛋白‑探针溶液滴加在纸上时，与蛋白特异性结合的探针的反式环辛烯端可与纸基上的W1的1,2,4,5‑四嗪结构端发生生物正交反应，反应后会有荧光增强效果，以荧光信号对样本的单胺氧化酶含量进行检测。本发明生物正交反应的纸基器件作为体外检测平台，该过程无需昂贵的抗体、复杂的仪器以及繁琐的检测，比免疫印迹检测更加方便，并且能够实现高通量的检测。