本发明提供一条与布鲁氏菌外膜蛋白Omp31具有高亲和力的核酸适配体，该适配体的核苷酸序列如序列表中序列1所示，全长76bp，两端20bp为固定序列，中间36bp由筛选后确定出唯一确定序列。本发明利用SELEX技术，以原核表达的Omp31为靶标蛋白，以羧基磁珠为固相载体，通过9轮筛选及高通量测序，从1015初始DNA文库中，筛选得出本条与靶标具有高亲和力的核酸适配体。核酸适配体相对于抗体，具有易合成保存、成本低廉等优点，为开发新型夹心ELISA检测试剂盒提供了新的思路，对布鲁氏菌的检测和预防具有重要意义。