本发明公开了一种靶向PSMA的巨噬细胞膜包裹的仿生纳米药物载体及应用，将巨噬细胞膜包裹纳米金载体，其中巨噬细胞膜上跨膜表达基于SEQ.ID.NO.1所示序列的靶向PSMA的抗体；该抗体为gy‑1单链抗体，通过与CD8a铰链区和CD8a跨膜区的融合表达使其跨膜表达于巨噬细胞膜上。本发明利用基因工程的方法，构建表达跨膜单链抗体的慢病毒载体，包装成慢病毒后用于感染巨噬细胞使其表达跨膜单链抗体，提取此细胞膜进行纳米载体的仿生化修饰；所制备的纳米载体有望克服传统纳米药物载体外源性强、靶向性弱这两大难题，可用于前列腺癌的靶向诊疗试剂、药物的制备。