蜻蜓凤梨AfFT2基因、克隆方法、表达载体及应用
摘要:
本发明公开蜻蜓凤梨AfFT2基因、克隆方法、表达载体及应用,提取蜻蜓凤梨总RNA,反转录合成cDNA,以此为模板,设计特异引物,利用PCR方法获得AfFT2基因的全长cDNA,与pMD‑18T载体连接,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆得到蜻蜓凤梨AfFT2基因,该基因的cDNA全长818bp,包括起始密码子前的上游序列和多聚A尾巴。利用实时荧光定量PCR测定了蜻蜓凤梨幼株(6‑7个月)和成株(12‑15个月)乙烯处理后AfFT2基因的表达水平,证实的乙烯处理后成株中的表达水平明显高于幼株。该基因会影响拟南芥开花和蜻蜓凤梨乙烯处理后开花。AfFT2基因的获得,为研究蜻蜓凤梨乙烯诱导开花机理奠定了基础,为凤梨植物栽培中乙烯催花技术的提高提供了理论参考,具有重要的理论及实践意义。
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