本发明属于生物工程领域，具体涉及双功能载体及其制备方法和应用。本发明所述载体包含噬菌粒载体的基本元件，其特征在于，所述载体还包括编码表达抗体的多核苷酸序列、SASA标签蛋白基因序列和琥珀终止密码子，所述编码表达抗体的多核苷酸序列和SASA标签蛋白基因序列在琥珀终止密码子的上游。本发明的载体能实现双功能的切换，增加了额外的标签蛋白，提升了后续筛选检测时的准确性，为后续的筛选检测提供了更多的可能性，从而能够大大提高检测效率。