本发明提出一种结直肠癌筛查标志组合物及其选取方法、结直肠癌筛查试剂盒，该结直肠癌筛查标志组合物在结直肠癌中高甲基化，白细胞中低甲基化，且具有甲基化敏感内切酶酶切位点，利用甲基化敏感内切酶不能切割甲基化位点的特性，降解非肿瘤来源cfDNA，特异扩增肿瘤来源ctDNA，极大提升检查灵敏度。并且ctDNA的检测是非侵入性的，具有迅速，便捷，无创的特点，可以提高患者对于结直肠癌筛选的接受度。通过更精准有效的检测排查早期结直肠癌，进而降低结直肠癌的死亡率，减少结直肠癌的伤害。