本发明涉及纳米材料技术领域，尤其涉及金硫化银蛋白复合水凝胶及其制备方法与应用。本发明提供的水凝胶包括：带负电荷的蛋白、带正电荷的光热异质纳米颗粒和带正电荷的壳聚糖(CS)；其中，带正电荷的光热异质纳米颗粒为金硫化银杂化纳米颗粒(Ag3AuS2NPs)；所述带负电荷的蛋白为类弹性蛋白‑绿色荧光蛋白复合蛋白——(VPGEG)72‑GFP。该水凝胶具备可注射性、高效光热治疗效果及生物相容性，光热效率可达到39.0％。通过瘤旁注射的方式将其均匀分散在肿瘤的周围，然后经照射产生光热转换，实现肿瘤的有效杀灭，减少肿瘤复发。