本发明公开了一种利用古菌分子标记OTU300快速检测城市绿地土壤全氮含量的方法。本发明提供了一种DNA分子(探针)，如序列表的序列1所示。本发明还保护所述探针在检测或辅助检测土壤全氮含量中的应用。本发明还保护所述探针在比较不同地块的土壤全氮含量中的应用。采用本发明提供的方法检测土壤全氮含量或比较不同地块的土壤全氮含量，具有如下优点：样品需求量小，无需前处理，所需时间短，人力成本低，可以实现对大批量样品的快速自动化检测。本发明对于土壤样品的测评具有重要应用推广价值。