本发明公开了山地虎耳草中新的二芳基壬烷类Ⅱ自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用。具体制备工艺为：提取、在线自由基抑制剂组分筛选、微孔树脂柱中压色谱粗分、在线自由基抑制剂筛选及反相制备柱制备五个步骤。上述方法制得的山地虎耳草中新的二芳基壬烷类Saximonsin B自由基抑制剂可在制备自由基抑制药物或保健食品中应用，具体作为有效成分按药学上或者食品科学上可接受的任何载体制成各类药用制剂或者保健类食品。本发明制备工艺中的提取溶剂、微孔树脂柱、反相色谱柱分离溶剂及反相色谱分离用材均可回收利用；原料来源广泛，甲醇室温冷浸提取等工艺步骤均可实现规模化操作，且高压制备色谱分离可以保证产品的纯度大于95％。