本发明公开了一种能高效制备且应用安全的嵌合抗原受体T细胞及其制备方法与应用。本发明提供了一种慢病毒重组载体，其含有CAR结构编码序列和驱动所述CAR结构编码序列表达的启动子MND；所述启动子MND的核苷酸序列为序列1第2838‑3236位。本发明为了克服当前CAR T治疗过程中的转染效率低和产生细胞因子量大的缺点，通过改善启动子对CAR结构的启动，即用MND启动子启动CAR结构，制备出新的嵌合抗原受体，并制备表达该嵌合抗原受体的T细胞，该T细胞具有影响CAR分子在细胞表面表达较少的特性，与CD19阳性细胞结合时，有着使细胞杀伤作用较缓和的优点，如此可大大降低细胞因子风暴的发生，有效提高了安全性。