本发明公开了一种药用替比培南匹伏酯的制备方法，包括如下步骤：以MAP与YKTP‑1为原料依次进行缩合、还原、取代反应，取代反应后的物料经过两次纯化获得药用替比培南匹伏酯；一次纯化过程为：向取代反应后的物料中加入乙酸乙酯进行过滤，向滤液中加水并调节pH，分液获得水层，调节水层pH，采用乙酸乙酯萃取获得有机层，对有机层进行洗涤，再干燥脱色、过滤，将滤液减压浓缩，析晶离心，乙酸乙酯淋洗滤饼，真空干燥获得YKTP‑4；二次纯化过程为：将YKTP‑4与乙酸乙酯混合，加入活性炭搅拌后进行过滤获得滤液，将滤液减压浓缩至YKTP‑4，析晶离心，乙酸乙酯淋洗滤饼，然后真空干燥获得药用替比培南匹伏酯。