本发明提供了一种通过超临界流体萃取技术从外消旋体中拆分光学异构体的方法。具体地，本发明将超临界流体萃取技术应用于酶拆分工艺中，主要应用于酶拆分后产物的分离。以D-泛解酸内酯制备工艺为例，关键点在于通过超临界流体萃取方法从酶拆分液中分离D-泛解酸和L-泛解酸内酯，取代了现有的有机溶剂提取方法，工艺方法简单易行，D-泛解酸收率高，纯度好，大大减少了有机溶剂的使用量，降低了生产成本，环境友好，可以很大程度地改善工人的工作环境，提高运行安全指数。本发明所提供的方法在酶拆分分离工艺中有很大的应用潜力。