本发明属于生物技术领域，公开了一种基于卡氏住白细胞虫重组R7蛋白的间接ELISA检测试剂盒及其间接ELISA检测方法，所述试剂盒以卡氏住白细胞虫重组R7蛋白为包被抗原。本发明以卡氏住白细胞虫重组R7蛋白作为抗原建立的检测卡氏住白细胞虫抗体的间接ELISA检测方法，特异性强、灵敏度高、重复性好、检测方便快捷，用建立的间接ELISA方法对鸡球虫、鸡新城疫病毒、禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病病毒以及鸡痘病毒的标准阳性血清进行检测，结果均为阴性；重复性试验结果显示变异系数小于10％，可用于鸡卡氏住白细胞虫病的抗体水平检测和流行病学调查。