本发明公开了一种高性能阴离子交换介质的制备方法，包括如下步骤：S1:将琼脂糖微球于碱液中进行溶胀处理；S2:向所述碱液中加入烯丙基缩水甘油醚，以对所述琼脂糖微球进行活化，接着对活化的琼脂糖微球进行溴化处理；S3:将溴化的琼脂糖微球在碱性条件下与葡聚糖进行接枝反应，得到接枝葡聚糖的琼脂糖微球；S4:将接枝葡聚糖的琼脂糖微球与阴离子交换配基偶联，得到所述高性能阴离子交换介质。本发明还公开了由所述方法制备的高性能阴离子交换介质。本发明的高性能阴离子交换介质，具有蛋白载量高、操作流速快、机械强度好等优点。