本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种连翘叶片TRV载体介导病毒诱导基因沉默的方法。所述方法为：将含有特定目标基因片段的TRV2载体和TRV1载体分别转化到农杆菌感受态中；筛选得到阳性菌株后，进行增殖培养得到含有不同载体的两种单克隆菌体；将两种单克隆菌体离心并利用侵染液分别重悬菌体至OD600＝0.9～1.1后，将二者等体积混合，得到混合侵染液；将所述混合侵染液注入连翘中，实现对特定目标基因的沉默。本发明深入探究了可提高侵染成功效率的关键因素，筛选出了最优的侵染液组成配方和侵染时含有菌体的侵染液的OD值。利用本发明所述方法对连翘进行侵染，可使连翘叶片VIGS侵染的成功率达90％以上。