本发明公开了一种磁柔性载体CMCC/DHBH‑Fe3O4的制备方法，包括以下步骤：制备羧甲基壳聚糖席夫碱产物；将羧甲基壳聚糖席夫碱产物与氰基硼氢化钠还原，得羧甲基壳聚糖席夫碱还原产物，然后加入Fe3O4纳米粒子的超声分散液，室温下搅拌10～14h后进行磁分离；将磁分离所得物经洗涤，干燥，获得磁柔性载体CMCC/DHBH‑Fe3O4。本发明还同时公开了上述磁柔性载体CMCC/DHBH‑Fe3O4的用途：用于固定化酶。采用本发明的磁柔性载体CMCC/DHBH‑Fe3O4固定化酶，具有高效、易回收和重复使用的特性。