本发明提供了一种通过一步反应简便和高精度的PSA测定方法，其中不使用具有不同平均粒度的载体。还提供了用于其的试剂。所述PSA测定方法包括：用两种类型的识别不同表位的抗PSA单克隆抗体固定化不溶性载体，所述载体具有大于0.20μm但等于或小于0.40μm的相同的平均粒度，所述两种类型的抗PSA单克隆抗体是与游离PSA和PSA‑ACT二者均反应的抗PSA单克隆抗体，所述PSA‑ACT是PSA与α1‑抗胰凝乳蛋白酶的复合物；和使该载体在存在凝集促进剂的条件下与样品接触。