本发明公开了基于8‑17 DNAzyme原理的铅离子荧光检测方法及其应用。在Pb2+作用下，8‑17 DNAzyme可以催化断裂其互补底物链，利用固定在芯片表面的探针捕获断裂后释放到溶液中的带荧光标记的部分底物链，借助于倏逝波激发捕获的底物链，建立荧光信号与Pb2+浓度的关系。本发明的检测方法可在室温(20‑30℃)20分钟完成Pb2+的检测，对Pb2+的最低检测限为20nM。本发明的检测方法可在室温能够快速、准确地进行饮用水中铅离子(Pb2+)的检测，而且特异性强，不受其它金属离子的干扰，重复性好。本发明的检测方法具有特异性强、性能稳定、易于再生、检测成本低、并能与仪器结合的优势。