本发明涉及一种快速检测大豆凝集素（SBA）的胶体金免疫层析试纸及制备方法，该试纸基于双抗体夹心的原理检测SBA，试纸含有支撑层、吸附层、保护层，吸附层从测试端依次为样品垫、结合垫、纤维素膜和吸水垫。结合垫吸附有SBA的特异性抗体，纤维素膜设有用SBA兔源多克隆抗体溶液喷点的检测线以及用羊抗小鼠IgG抗体或兔抗小鼠IgG抗体溶液喷点的质控线，SBA的特异性抗体采用胶体金纳米颗粒标记的SBA鼠源单克隆抗体。本发明的免疫层析试纸特异性强、灵敏度高，检测简便、直观、准确，成本低，适用范围广，易于推广应用。