本发明涉及一种测定白酒中环二肽的方法，包括以下步骤：a、取白酒酒样，过SPE C18柱后，再用甲醇洗脱，洗脱液在温度不高于60℃下浓缩至原白酒酒样体积的1/50～1/10，得待测样品；b、将步骤a的待测样品上样至液相-质谱联用仪，质谱全离子扫描后，通过全离子扫描峰，初步得出可能存在的环二肽；c、再将步骤a的待测样品上样至液相-质谱联用仪，针对每一种可能存在的环二肽，通过选择离子检测后，得到特征离子峰；d、根据步骤c得到的特征离子峰，进一步证明白酒中是否存在步骤b得出的环二肽，最后得出结论。本发明方法可以准确、快速地测定出白酒样品中环二肽的种类，为白酒中环二肽的检测提供了更有效的方法。