本发明属于生物工程技术领域，公开了一种检测TIM?3试剂盒及使用方法，本发明还公开用于检测Tim?3的单克隆抗体或其片段，所述抗体或其片段包括轻链CDR1、轻链CDR2、轻链CDR3、重链CDR1、重链CDR2和重链CDR3，各个CDR具有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：6所示氨基酸序列。本发明提供的单克隆抗体能够特异性与人Tim?3相结合，用所述抗体制备的检测人Tim?3的试剂盒，具有较高的灵敏度，能够检测出较低浓度的人Tim?3。