本发明公开了一种MUC1和GM-CSF双基因共表达重组载体，其沿载体转录方向依次连接有MUC1基因、IRES序列和GM-CSF基因，或者沿载体转录方向依次连接有GM-CSF基因、IRES序列和MUC1基因；所述MUC1基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示，所述GM-CSF基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示，所述IRES序列的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:3所示。本发明所述的双基因共表达重组载体，采用IRES序列来连接MUC1基因和GM-CSF基因，能够在同一载体中同时表达人上皮粘蛋白以及粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子，该重组载体可用于肿瘤的基因免疫治疗，既能发挥细胞因子的免疫调节作用，又能靶向性地产生特异性抗肿瘤效应。