本发明公开了一种快速测定胰蛋白酶的比色分析方法。包括以下步骤：检测银纳米颗粒的紫外-可见光谱；将胰蛋白酶与多肽修饰银纳米颗粒进行显色反应；显色反应终点再检测反应产物的紫外-可见光谱；计算银纳米颗粒的吸光值峰值与反应产物的吸光值峰值的差值，根据差值与预定的标准曲线比对，得到胰蛋白酶的含量。本发明提供的检测方法对胰蛋白酶具有高灵敏的选择性响应，最低检测浓度达到2ng/mL，本发明提供的检测方法无须进行复杂的化学修饰或信号标记，抗干扰能力强，能快速、精确的实现对胰蛋白酶的检测，适于在临床应用，如胰腺炎等疾病的诊断。