本发明涉及生物医药技术领域，涉及利用基因工程技术获得镇痛活性肽GRR两个突变体、镇痛活性肽GRR两个突变体衍生物、类似物、活性片段的结构及其制备方法和镇痛活性肽GRR两个突变体及其衍生物、类似物、活性片段作为镇痛药物在医药领域中的应用。所述的镇痛活性肽GRR两个突变体氨基酸序列如下：GRDAFIAQNYNCVYHCFRDDYCNGLCTENGADSGYCYLAGKYGHACWCINLPDDKPIRIPGKCHRR。和GRDAYIAQNYNCVYHCFRDDYCNGLCTENGADSGYCYLAGKFGHACWCINLPDDKPIRIPGKCHRR。所述的镇痛活性肽GRR两个突变体及其衍生物或类似物或活性片段可以与药学上可接受的载体混合制备临床上可接受的注射剂、口服制剂、透皮吸收制剂、粘膜吸收制剂等用于各类痛症。本发明所述的镇痛活性肽GRR两个突变体具有较好的镇痛活性，其获得方法常规、简单、产量高。