本发明属于生物质能技术领域，特别涉及一种B5生物柴油调和燃料及其制备方法。所述调和燃料的体积百分比组成为：0#柴油94-95%、乙酰丙酸乙酯2-4%、生物柴油1-3%和助溶剂0.03-0.05%，十六烷值提高剂0.01-0.05%。本发明配制的B5系列调和燃料，其理化特性和动力性能满足GB/T25199-2010《生物柴油调合燃料（B5）》，其在柴油机中燃烧的碳烟、一氧化碳、二氧化碳、氮氧化物等污染物排放比燃烧柴油有明显降低，可广泛用于车用柴油发动机，实现节能减排。