本发明涉及序批式苎麻无废生物脱胶方法，包括预处理和四次浸泡步骤，其中：第一次浸泡是将经漂白、生物灭活操作的脱胶废水浸泡预处理后的苎麻，浸泡8h；第二次浸泡是将预处理后的苎麻浸泡于活菌量为107cfu/ml的兼性厌氧脱胶菌液中，37℃浸泡8h；第三次浸泡是将第一次浸泡过的苎麻浸泡于活菌量为107cfu/ml的好氧脱胶菌液中，37℃浸泡8h；第四次浸泡是将第二次浸泡过的苎麻浸泡于EDTA二钠5g/L、NaOH2g/L的溶液中，55℃反应4h，最后升温至80℃，保温1h；四次浸泡的浴比均为1：（10-20）。本发明苎麻脱胶过程与脱胶废水处理一体化进行，脱胶废水经处理后全部回用，没有污水排放。