一种生物反应器大规模培养的方法
摘要:
本发明一种生物反应器大规模培养的方法,其步骤:(1)重组H5N1禽流感病毒在MDCK细胞上适应;(2)病毒株作为反应器大规模培养病毒种子批制备,种子批病毒代次≥F6;血凝效价≥28;EID50≥107.5;(3)以聚酯片为载体培养MDCK细胞,以聚酯片为载体,反应器为篮式固定床,每克载体投放细胞;培养基为新生牛血清DMEM;(4)培养的MDCK细胞接种病毒,病毒稀释液清洗细胞,病毒接种;吸附后更换细胞维持液;(5)MDCK细胞维持和病毒增殖,搅拌,更换细胞维持液;(6)监测血凝效价收获病毒,收获反应器培养体积病毒液。方法易行,操作简便,适应后病毒HA效价>27,解决了目前重组H5亚型禽流感病毒在MDCK细胞上培养病毒滴度不能满足疫苗生产的难题。
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