本发明提供一种携带乙肝病毒抗原表位的重组嵌合蛋白及其制备，具体是分别携带有乙肝病毒S82、C19、S125、S2[8]、S1[93]或C117抗原表位的重组嵌合蛋白，以及同时携带乙肝病毒S82,C19，S125，S2[8],S1[93]和C117抗原表位的重组嵌合蛋白，经免疫学WesternBlot检测，所述各个重组蛋白不仅具有VP6F蛋白的抗原反应性与免疫原性，还具有HBV抗原表位的抗原反应性和免疫原性，且不具有传染性，没有毒力返祖和肠套叠等副作用，对开发新一代RV/HBV重组嵌合疫苗及试剂具有重要价值。