本发明公开了一种猪链球菌、副猪嗜血杆菌病二联灭活疫苗及制备方法，其步骤：a．分别将猪链球菌株菌种、副猪嗜血杆菌株菌种和副猪嗜血杆菌株菌种增殖培养，得到猪链球菌菌液、副猪嗜血杆菌株菌液和副猪嗜血杆菌株菌液；b．分别向猪链球菌株菌液、副猪嗜血杆菌株菌液和副猪嗜血杆菌株菌液中加入甲醛溶液，灭活；c．将收集的猪链球菌株菌液、副猪嗜血杆菌株菌液和副猪嗜血杆菌株菌液混合，加入吐温-80制成水相，将白油、司本-80和硬脂酸铝制成油相，水相与油相混合，制成均匀乳剂，为油乳剂灭活疫苗；d．将油乳剂灭活疫苗进行分装。该疫苗能有效的预防猪链球菌病和副猪嗜血杆菌病，只需一针免疫，降低了成本，而且不存在散毒的隐患，安全可靠。