本发明公开了一种能同时检测水貂犬瘟热病毒、肠炎细小病毒和阿留申病毒的三重PCR试剂盒，其组成包括:DNA聚合酶，dNTPs，引物，PCR缓冲液，双蒸水；其特征在于：所述的引物由3对引物组成，其中，第1对引物的序列为5’-GATAAAGCATGTCATTATAGTCCTAA-3’和5’-CTTGAGCTTTCGACCTTC-3’，第2对引物的序列为5’-AACTGGGCGGAGCCTAAA-3’和5’-CAGAGCGAAGATAAGCAG-3’，第3对引物的序列为 5’-GAAACCACGGTGGAGACA-3’和5’-AAGAGTTGACCTGGAGGG-3’。采用本发明多重PCR试剂盒可在同一反应体系中同时检测出是否有水貂犬瘟热病毒、肠炎细小病毒和阿留申病毒的感染或多重感染，具有较高的特异性和敏感性，从而节省时间和试剂，可以为貂群的快速和早期诊断提供有效的工具。