胰蛋白酶亲和层析纯化人重组SPINK6蛋白的方法

    公开(公告)号:CN103122028B

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201110369066.4

    申请日:2011-11-18

    IPC分类号: C07K14/81 C07K1/22

    摘要: 本发明公开了一种人重组SPINK6蛋白的亲和层析纯化方法,其包括:将胰蛋白酶与亲和层析介质混合,偶联反应,制得胰蛋白酶亲和层析介质;将人重组SPINK6蛋白通过预先用缓冲液A平衡好的装有所述的胰蛋白酶亲和层析介质的层析柱;然后用缓冲液A清洗上样后的胰蛋白酶亲和层析柱;再用缓冲液B将SPINK6蛋白从层析柱上洗脱,并收集洗脱峰。本发明方法获得的人重组SPINK6蛋白的活性回收率为45-60%,纯度可达90%-95%,蛋白纯化倍数为10-20倍以上。本方法处理速度快、重复性好、柱效长且结合效率基本不变。

    KLK14蛋白亲和层析纯化人重组SPINK6蛋白的方法

    公开(公告)号:CN103122029B

    公开(公告)日:2015-10-28

    申请号:CN201110369655.2

    申请日:2011-11-18

    IPC分类号: C07K14/81 C07K1/22

    摘要: 本发明公开了一种人重组SPINK6蛋白的亲和层析纯化方法,包括:将人重组KLK14蛋白与亲和层析介质混合,偶联反应,制得人重组KLK14蛋白亲和层析介质;将人重组SPINK6蛋白通过预先用缓冲液A平衡好的装有上述的胰蛋白酶亲和层析介质的层析柱;然后用缓冲液A清洗上样后的人重组KLK14蛋白亲和层析柱;再用缓冲液B将SPINK6蛋白从层析柱上洗脱,并收集洗脱峰。采用本发明的方法,人重组SPINK6蛋白的活性回收率为45-60%,纯度可达90%-95%,蛋白纯化倍数为10-20倍以上。本发明方法处理速度快、重复性好、柱效长且结合效率基本不变。

    KLK14蛋白亲和层析纯化人重组SPINK6蛋白的方法

    公开(公告)号:CN103122029A

    公开(公告)日:2013-05-29

    申请号:CN201110369655.2

    申请日:2011-11-18

    IPC分类号: C07K14/81 C07K1/22

    摘要: 本发明公开了一种人重组SPINK6蛋白的亲和层析纯化方法,包括:将人重组KLK14蛋白与亲和层析介质混合,偶联反应,制得人重组KLK14蛋白亲和层析介质;将人重组SPINK6蛋白通过预先用缓冲液A平衡好的装有上述的胰蛋白酶亲和层析介质的层析柱;然后用缓冲液A清洗上样后的人重组KLK14蛋白亲和层析柱;再用缓冲液B将SPINK6蛋白从层析柱上洗脱,并收集洗脱峰。采用本发明的方法,人重组SPINK6蛋白的活性回收率为45-60%,纯度可达90%-95%,蛋白纯化倍数为10-20倍以上。本发明方法处理速度快、重复性好、柱效长且结合效率基本不变。

    胰蛋白酶亲和层析纯化人重组SPINK6蛋白的方法

    公开(公告)号:CN103122028A

    公开(公告)日:2013-05-29

    申请号:CN201110369066.4

    申请日:2011-11-18

    IPC分类号: C07K14/81 C07K1/22

    摘要: 本发明公开了一种人重组SPINK6蛋白的亲和层析纯化方法,其包括:将胰蛋白酶与亲和层析介质混合,偶联反应,制得胰蛋白酶亲和层析介质;将人重组SPINK6蛋白通过预先用缓冲液A平衡好的装有所述的的胰蛋白酶亲和层析介质的层析柱;然后用缓冲液A清洗上样后的胰蛋白酶亲和层析柱;再用缓冲液B将SPINK6蛋白从层析柱上洗脱,并收集洗脱峰。本发明方法获得的人重组SPINK6蛋白的活性回收率为45-60%,纯度可达90%-95%,蛋白纯化倍数为10-20倍以上。本方法处理速度快、重复性好、柱效长且结合效率基本不变。