一种DNA Marker制备的紧凑型质粒的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN116411001A

    公开(公告)日:2023-07-11

    申请号:CN202310387704.8

    申请日:2023-04-12

    Abstract: 本发明提供了一种用于DNAMarker制备的紧凑型质粒的构建方法,该构建方法为:在参考质粒P1中的筛选标记基因S1内找到或引入一个目标限制性内切酶X的切点Q1,在不改变筛选标记基因S1对应蛋白序列和复制起始点序列Ori的前提下,以Q1为锚定点,引入更多限制性内切酶X识别位点,设计出目标质粒P2序列;以P2序列为蓝本,通过化学合成及扩增拼接方法获得目标质粒P2,即紧凑型质粒pM4850。本发明还提供了所述质粒的应用,该质粒长度4850bp,核苷酸序列为SEQ ID NO:5,包含36个限制性内切酶BamHI切点,单酶切可获得12种特征片段,大小依次为700bp、600bp、500bp、400bp、300bp、250bp、200bp、150bp、100bp、75bp、50bp和25bp,各片段的相对质量比为7:6:5:4:3:2.5:6:3:3:3:3:3,可作为小片段DNAMarker应用于科学研究和生物技术领域。

    用于检测麦秆蝇的LAMP引物组、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN118979113A

    公开(公告)日:2024-11-19

    申请号:CN202411383370.8

    申请日:2024-09-30

    Abstract: 本发明属于麦秆蝇鉴定技术领域,具体涉及用于检测麦秆蝇的LAMP引物组、试剂盒及其应用。所述LAMP引物组包括SEQ ID NO.1所示的外引物F3、SEQ ID NO.2所示的外引物B3、SEQ ID NO.3所示的内引物FIP和SEQ ID NO.4所示的内引物BIP。本发明还提供了检测麦秆蝇的试剂盒,所述LAMP引物组、试剂盒在鉴定和/或检测麦秆蝇中的应用,利用所述LAMP引物组检测麦秆蝇的方法,该方法具有特异性强、灵敏度高、操作过程简单、检测成本低等优点,解决区分麦秆蝇的难题,为今后麦秆蝇的检疫检验、疫情监测与防控奠定了基础。

    一种基于RPA-CRISPR/Cas12a检测麦角病菌的引物、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN118879927A

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202411300795.8

    申请日:2024-09-18

    Abstract: 本发明提供了一种基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测麦角病菌的引物,包括RPA上游引物、RPA下游引物和crRNA引物及通用引物,核苷酸序列如SEQ ID NO.1~4所示;还提供了试剂盒,包括基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测麦角病菌的引物、Cas12a蛋白、T7转录酶、DNA聚合酶、缓冲液、Cas12/13专用核酸检测试纸条;还提供了检测方法:首先提取待测样品DNA,然后用RPA上、下游引物通过RPA扩增技术扩增靶标序列,随后以RPA扩增产物和crRNA、Cas12a蛋白、FB探针建立RPA‑CRISPR/Cas12a检测体系,得到RPA‑CRISPR/Cas12a反应产物,用Cas12/13专用核酸检测试纸条进行检测。本发明基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测麦角病菌的检测方法具有用时短、特异性强、灵敏度高、结果准确等优点。

    一种西洋参蕈蚊侵害无损检测方法

    公开(公告)号:CN118225724A

    公开(公告)日:2024-06-21

    申请号:CN202410327996.0

    申请日:2024-03-21

    Abstract: 本发明涉及农业虫害检测方法领域,具体公开了一种西洋参蕈蚊侵害无损检测方法,首先通过抽样法测定部分西洋参叶片的SPAD值并调查其根部蕈蚊的侵害程度,确定西洋参不同根部蕈蚊的侵害程度对应的SPAD值阈值,然后测定剩余西洋参叶片的SPAD值,对应已知SPAD值阈值判断西洋参根部蕈蚊的侵害程度。本发明提供的西洋参蕈蚊侵害检测方法能够通过测定西洋参叶片的SPAD值反映蕈蚊在地下参根的侵害情况,且检测结果准确率达到73.33‑86.67%。

    一种玉米大斑病预报装置

    公开(公告)号:CN111626522A

    公开(公告)日:2020-09-04

    申请号:CN202010494841.8

    申请日:2020-06-03

    Inventor: 胡小平 黄卫利

    Abstract: 本发明公开了一种玉米大斑病预报装置及方法,该装置包括控制箱本体,还包括设置在控制箱本体外部的数据采集模块和太阳能供电模块,设置在控制箱本体内部的中央控制模块、数据处理模块和物联网模块;数据采集模块用于采集日照时长、雨日数和温度数据;太能能供电模块用于提供稳定的工作电压;中央控制模块用于接收数据采集模块采集到的数据并将采集到的数据存储到数据处理模块;数据处理模块用于对接收到的数据进行存储和处理;物联网模块用于将经过数据处理模块处理的数据传输给远端服务器,该方法使用本发明的预报装置,计算得出玉米大斑病的发病株率,完成玉米大斑病的发病程度预测,该方法实用性强,为及时准确制定防治方案提供科学依据。

    小麦条锈菌17号生理小种的分子检测方法

    公开(公告)号:CN103555824A

    公开(公告)日:2014-02-05

    申请号:CN201310416116.9

    申请日:2013-09-08

    CPC classification number: C12Q1/04 C12Q1/686 C12Q2535/139 C12Q2531/113

    Abstract: 本发明公开了一种小麦条锈菌17号生理小种的分子检测方法。采用RAPD分子标记转化为SCAR分子标记的方法,获得了17号生理小种的特异性引物(上游引物5’-TTCCCCCGCTGTCT,下游引物5’-GTTGAGCGGGGGAA),经过PCR扩增反应(反应条件:94℃,5min,1循环;94℃,30s,60℃,1min,72℃,90s,35循环;72℃7min1循环)、2%琼脂糖凝胶电泳,可获得约1000bp的特异性条带。因此,本发明可用于从分子水平快速鉴别和区分小麦条锈菌17号生理小种,为开展小麦条锈病分子流行学研究奠定了基础。

    用于检测麦秆蝇的LAMP引物组、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN118979113B

    公开(公告)日:2025-03-21

    申请号:CN202411383370.8

    申请日:2024-09-30

    Abstract: 本发明属于麦秆蝇鉴定技术领域,具体涉及用于检测麦秆蝇的LAMP引物组、试剂盒及其应用。所述LAMP引物组包括SEQ ID NO.1所示的外引物F3、SEQ ID NO.2所示的外引物B3、SEQ ID NO.3所示的内引物FIP和SEQ ID NO.4所示的内引物BIP。本发明还提供了检测麦秆蝇的试剂盒,所述LAMP引物组、试剂盒在鉴定和/或检测麦秆蝇中的应用,利用所述LAMP引物组检测麦秆蝇的方法,该方法具有特异性强、灵敏度高、操作过程简单、检测成本低等优点,解决区分麦秆蝇的难题,为今后麦秆蝇的检疫检验、疫情监测与防控奠定了基础。

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