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公开(公告)号：CN119677875A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202280096180.0
申请日：2022-11-04
Applicant: 深圳华大生命科学研究院
IPC: C12Q1/6869 , G01N33/566 , C12N15/10 , C07K14/725 , A61P35/00
Abstract: 一种检测细胞间相互作用的方法，所述方法包括(1)制备表达TCR激活响应元件和报告分子的第一细胞，所述第一细胞表达TCR；(2)将抗原肽与表达MHC的第二细胞孵育，得到加载抗原肽的第二细胞；(3)使用第一标签对所述第一细胞进行标记，得到携带标签的第一细胞，以及使用第二标签对所述加载抗原肽的第二细胞进行标记，得到携带标签的第二细胞；(4)使用油相包裹所述携带标签的第一细胞、所述携带标签的第二细胞和磁珠以制备多个液滴；(5)向单个液滴中注入细胞裂解液，对裂解后核酸进行测序；(6)根据测序结果确定单个液滴中第一细胞与第二细胞是否存在相互作用。
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公开(公告)号：CN118556076A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202280088735.7
申请日：2022-01-17
Applicant: 深圳华大生命科学研究院
Abstract: 本发明提出了获取特异性识别抗原的纳米抗体信息的方法，包括：从受试者的外周血淋巴细胞中富集B细胞；利用微流控液滴生成芯片，将含有抗原和信号检测试剂的溶液与单个B细胞包裹在单个液滴内；将生成的单个液滴进行孵育，以使B细胞分泌纳米抗体以及抗原与纳米抗体发生特异性结合；利用液滴分选芯片对孵育后的液滴进行分选，对收集的可检测信号进行分析，以便分选出可分泌目标纳米抗体的目标细胞，收集包含目标细胞的阳性液滴；对目标细胞进行单细胞测序，以便获取目标纳米抗体信息。
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公开(公告)号：CN118103521A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202180103265.2
申请日：2021-10-20
Applicant: 深圳华大生命科学研究院
IPC: C12Q1/6809 , G16B20/00 , C12M1/34
Abstract: 本发明公开了筛选药物的方法，其包括：(1)提供第一液滴、第二液滴、第三液滴和微井阵列芯片；(2)先将第二液滴加入微井阵列芯片内并落入大微井内，再将第一液滴加入微井阵列芯片内并落入小微井内；(3)使第一液滴和第二液滴发生融合，将微井阵列芯片进行细胞培养；(4)细胞培养完成后，将第三液滴加入空出的小微井内，第三液滴与细胞培养后的第一融合液滴发生融合，得到第二融合液滴；(5)将第二融合液滴进行破乳，收集磁珠，将磁珠上携带的核酸进行建库和测序，基于测序结果筛选出目标药物。
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公开(公告)号：CN115639363A
公开(公告)日：2023-01-24
申请号：CN202110820465.1
申请日：2021-07-20
Applicant: 深圳华大生命科学研究院
IPC: G01N33/543 , G01N33/533
Abstract: 本发明公开了一种抗原特异性抗体分泌细胞的检测和分选方法。所述方法包括如下步骤：1)将液滴生成油、水相1和水相2分别加入微液滴生成芯片对应的孔内，生成微液滴；水相1为可分泌具有抗原特异性抗体的细胞溶液；水相2的制备方法为向链霉亲和素磁珠中加入与所述抗体对应的生物素化的抗原或与所述抗体对应的生物素化的二抗，将结合抗原或二抗的磁珠与荧光二抗或荧光抗原混合，得到水相2；2)将微液滴进行孵育，使细胞分泌抗体，实现抗原‑抗体‑检测抗体或二抗‑抗体‑荧光抗原的充分结合，得到孵育后液滴；3)将孵育后液滴上样至液滴分选芯片，通过检测Beadline上的单荧光信号实现液滴的检测和分选。
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公开(公告)号：CN118647871A
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202280089454.3
申请日：2022-01-18
Applicant: 深圳华大生命科学研究院
Abstract: 确定多种物质与细胞作用关系的方法，包括：提供第一液滴、第二液滴、第三液滴和微井阵列芯片，微井阵列芯片上有多个微井组合，每个微井组合包括一个大微井(110)和多个与大微井(110)相邻且连通的小微井(120)，大微井(110)的孔径大于小微井(120)的孔径(S100)；先将第二液滴加入微井阵列芯片内并落入大微井(110)内，再将第一液滴加入微井阵列芯片内并落入多个小微井(120)内(S200)；使第一液滴和第二液滴发生融合，将微井阵列芯片进行细胞培养(S300)；细胞培养完成后，将第三液滴加入空出的小微井(120)内，第三液滴将与细胞培养后的第一融合液滴发生融合，得到第二融合液滴(S400)；将第二融合液滴进行破乳，收集磁珠，将磁珠上携带的核酸进行建库和测序，基于测序结果确定多种物质与细胞作用关系(S500)。
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公开(公告)号：CN115400809B
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202110593330.6
申请日：2021-05-28
Applicant: 深圳华大生命科学研究院
IPC: B01L3/02
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种回收油包水液滴中内容物的方法及液滴生成装置。所述方法包括：1)向油包水液滴中加入破乳剂，然后静置；2)将静置后的液体最下层的油相移出；3)向所得的液体中再次加入破乳剂，然后静置；4)将所得的液体进行低速离心，所述液体形成上下两层，中间有界面；5)收集所述界面之上包含所述内容物的液体，不触及所述中间的界面。与现有技术中已有方法相比，本发明的方法操作时间近似，但是细胞回收率显著提高；细胞活率较高；减少破乳剂污染样品的可能。
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公开(公告)号：CN117178083A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202180097147.5
申请日：2021-04-22
Applicant: 深圳华大生命科学研究院
IPC: C40B50/06
Abstract: 本发明提供了一种RNA测序文库的构建方法、测序方法及试剂盒。其中，构建方法包括：获取mRNA的逆转录产物单链cDNA，单链cDNA的3’端含有cDNA标签序列；将单链cDNA环化得到单链环化cDNA；利用随机引物或基因特异性引物与cDNA标签引物形成的引物组合对单链环化cDNA扩增，得到扩增片段，cDNA标签引物为cDNA标签序列的至少一部分；对扩增片段进行片段化文库构建得到RNA测序文库。
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公开(公告)号：CN117083516A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202180096479.1
申请日：2021-08-20
Applicant: 深圳华大生命科学研究院
IPC: G01N21/64
Abstract: 一种检测和分选抗原特异性T细胞受体的方法，所述方法利用微流控技术来制备仅包含一个TCR表达细胞的液滴，并由此实现对不同TCR的高通量检测和分选。借助液滴微流控技术，可以一次性制备上百万个液滴，细胞可以在液滴内独立地完成抗原特异性的检测，相对在孔板内检测细胞相互作用，通量显著提高。
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公开(公告)号：CN115400809A
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202110593330.6
申请日：2021-05-28
Applicant: 深圳华大生命科学研究院
IPC: B01L3/02
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种回收油包水液滴中内容物的方法及液滴生成装置。所述方法包括：1)向油包水液滴中加入破乳剂，然后静置；2)将静置后的液体最下层的油相移出；3)向所得的液体中再次加入破乳剂，然后静置；4)将所得的液体进行低速离心，所述液体形成上下两层，中间有界面；5)收集所述界面之上包含所述内容物的液体，不触及所述中间的界面。与现有技术中已有方法相比，本发明的方法操作时间近似，但是细胞回收率显著提高；细胞活率较高；减少破乳剂污染样品的可能。
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公开(公告)号：CN209741157U
公开(公告)日：2019-12-06
申请号：CN201920191691.6
申请日：2019-02-11
Applicant: 深圳华大生命科学研究院
Abstract: 一种便携式微珠洗涤与回收装置，包括：洗涤回收槽；洗涤回收槽用于洗涤微珠；废液收集槽，废液收集槽与洗涤回收槽相连通；废液收集槽收集从洗涤回收槽流入的液体；多孔膜，多孔膜收容在洗涤回收槽的底部或被夹持在洗涤回收槽与废液收集槽的主体部分之间；多孔膜截留微珠；及负压产生组件，负压产生组件与废液收集槽相连通；负压产生组件产生负压，以使得洗涤回收槽内的液体通过多孔膜上的孔流入废液收集槽内。本实用新型还包括一种单细胞测序样品处理系统。本实用新型提供的便携式微珠洗涤与回收装置及单细胞测序样品处理系统能够降低交叉污染风险、提高微珠回收率且不限制微珠种类。
