一种细胞外囊泡体外装载mRNA的方法

    公开(公告)号:CN114404388B

    公开(公告)日:2022-07-26

    申请号:CN202210329162.4

    申请日:2022-03-31

    Abstract: 本发明公开一种细胞外囊泡体外装载mRNA的方法,在中性条件下携带弱负电或电中性脂质体,在弱酸性条件下进行mRNA装载,将mRNA与阳离子脂质体共孵育后装载细胞外囊泡,装载后的细胞外囊泡通过超滤换液恢复到中性;抽提样品中的RNA,通过RT‑qPCR定量检测mRNA拷贝数,检测装载前后mRNA拷贝数,比值为mRNA在细胞外囊泡中的包封率。与传统方法比较,本发明提供的方法操作简单,对操作技术水平要求低、实验周期短;对于所要转载的mRNA限制少,相应的具有较广的应用范围;在中性条件下携带弱负电或电中性脂质,在弱酸性条件下进行mRNA装载,装载后的细胞外囊泡通过换液的方法恢复到中性环境,可以规避阳离子脂质体携带正电荷而存在细胞毒性的问题,能够用于制备生物制品。

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