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公开(公告)号：CN102660499B
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201210162406.0
申请日：2012-05-23
申请人： 郑州赛英科干细胞技术有限公司
IPC分类号： C12N5/0735
摘要： 本发明涉及生物技术领域，公开了一种胎盘造血干细胞及其制备方法和胎盘造血干细胞注射剂。该制备方法将胎盘预处理后，用Ⅳ型胶原酶消化液和Ⅱ型胶原酶消化液消化，然后洗涤、过滤，分别收集第一滤液和第一滤渣；将所述第一滤渣用Ⅰ型胶原酶消化液和步骤1所述Ⅱ型胶原酶消化液消化，然后洗涤、过滤，收集第二滤液；合并两次滤液并离心，弃上清后重悬沉淀，将重悬液加至人淋巴细胞分离液中，然后密度梯度离心，收集中间一层的白膜层细胞液并离心，弃上清后即得胎盘造血干细胞。本发明采用Ⅳ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶联合、Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶联合，利用不同胶原酶的特性充分消化胎盘制备造血干细胞，提高了所制备的造血干细胞的数量和活力。
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公开(公告)号：CN102763642B
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201210288706.3
申请日：2012-08-14
申请人： 郑州赛英科干细胞技术有限公司
摘要： 本发明涉及组织工程技术领域，公开了一种冷冻保护液以及冷冻保存人胎盘羊膜和绒毛膜的方法。本发明所述由胎牛血清、二甲基亚砜和右旋糖酐40组成，所述胎牛血清、二甲基亚砜和右旋糖酐40的体积比为7-9:1∶1。本发明在深入研究人胎盘羊膜和绒毛膜结构性的基础上，选择适合于保护人胎盘羊膜干细胞和绒毛膜干细胞的二甲基亚砜、右旋糖酐40和胎牛血清组成保护液，三者协同保护细胞的活性，防止细胞形成冰晶受到损伤，确保了复苏后的干细胞活性与新制备的羊膜和绒毛膜干细胞活性无差别。
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公开(公告)号：CN102763642A
公开(公告)日：2012-11-07
申请号：CN201210288706.3
申请日：2012-08-14
申请人： 郑州赛英科干细胞技术有限公司
IPC分类号： A01N1/02
摘要： 本发明涉及组织工程技术领域，公开了一种冷冻保护液以及冷冻保存人胎盘羊膜和绒毛膜的方法。本发明所述由胎牛血清、二甲基亚砜和右旋糖酐40组成，所述胎牛血清、二甲基亚砜和右旋糖酐40的体积比为7-9:1∶1。本发明在深入研究人胎盘羊膜和绒毛膜结构性的基础上，选择适合于保护人胎盘羊膜干细胞和绒毛膜干细胞的二甲基亚砜、右旋糖酐40和胎牛血清组成保护液，三者协同保护细胞的活性，防止细胞形成冰晶受到损伤，确保了复苏后的干细胞活性与新制备的羊膜和绒毛膜干细胞活性无差别。
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公开(公告)号：CN102660499A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210162406.0
申请日：2012-05-23
申请人： 郑州赛英科干细胞技术有限公司
摘要： 本发明涉及生物技术领域，公开了一种胎盘造血干细胞及其制备方法和胎盘造血干细胞注射剂。该制备方法将胎盘预处理后，用Ⅳ型胶原酶消化液和Ⅱ型胶原酶消化液消化，然后洗涤、过滤，分别收集第一滤液和第一滤渣；将所述第一滤渣用Ⅰ型胶原酶消化液和步骤1所述Ⅱ型胶原酶消化液消化，然后洗涤、过滤，收集第二滤液；合并两次滤液并离心，弃上清后重悬沉淀，将重悬液加至人淋巴细胞分离液中，然后密度梯度离心，收集中间一层的白膜层细胞液并离心，弃上清后即得胎盘造血干细胞。本发明采用Ⅳ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶联合、Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶联合，利用不同胶原酶的特性充分消化胎盘制备造血干细胞，提高了所制备的造血干细胞的数量和活力。
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