乳糖负传感质粒及负反馈乳糖生物传感器

    公开(公告)号:CN116083465B

    公开(公告)日:2024-01-05

    申请号:CN202310009401.2

    申请日:2023-01-03

    Abstract: 乳糖,具有高敏感性和高效率等优势。同时,公布本发明公开了一种乳糖负传感质粒,质粒上 了负反馈乳糖生物传感器在筛选高产母乳寡糖带有乳糖诱导表达的mf‑Lon蛋白酶基因和组成 菌株中的应用,包括自动化检测和微流控筛选等型表达的荧光蛋白‑pdt#3基因,还公开了负反馈 应用领域。乳糖生物传感器,是一个带有乳糖负传感质粒的大肠杆菌菌株。当样品中含有乳糖时,乳糖会诱导mf‑Lon蛋白酶的表达,通过识别荧光蛋白‑pdt#3的pdt#3标签靶向快速降解荧光蛋白。当培养环境中不含有乳糖时,mf‑Lon蛋白酶无法表(56)对比文件Clement T. Y. Chan等“.Deadman” and“Passcode” microbial kill switches forbacterial containment.Nat Chem Biol.2016,第12卷(第2期),第82-86页.何利波.含有乳糖操纵子系统的重组虹彩病毒的构建和分析.2012年鄂粤微生物学学术年会——湖北省暨武汉微生物学会成立六十年庆祝大会论文集.2012,摘要.

    一种低温中性蛋白酶及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN117247922A

    公开(公告)日:2023-12-19

    申请号:CN202311470068.1

    申请日:2023-11-06

    Abstract: 本发明属于基因工程及酶工程技术领域,具体涉及一种海洋微生物荷氏科尔韦尔氏菌来源的低温中性蛋白酶及其制备方法和在水解蛋白质中的应用。本发明将来源于荷氏科尔韦尔氏菌的蛋白酶基因与表达载体pPIC9K连接,获得重组质粒,接着将重组质粒电转化至毕赤酵母细胞,并利用甲醇诱导目的基因表达,表达产物离心、去除上清后,即获得重组低温中性蛋白酶。该重组低温中性蛋白酶可以用于鱼粉的水解,而且该重组低温中性蛋白酶在15℃~35℃范围内酶活力较高,在15℃时仍保持在60%以上,是一种在低温或者常温下可以保持较高活性的中性低温金属蛋白酶。

    质粒及PV蛋白酶抑制剂筛选及药效评价的方法

    公开(公告)号:CN117089576A

    公开(公告)日:2023-11-21

    申请号:CN202311362594.6

    申请日:2023-10-20

    Abstract: 本发明公开了质粒及PV蛋白酶抑制剂筛选及药效评价的方法,在GFP中插入脊髓灰质炎病毒的3C蛋白酶相关裂解位点的序列,形成改造后的GFP报告蛋白,在上述改造后的GFP报告蛋白质粒上,克隆表达脊髓灰质炎病毒蛋白酶,可用于检测3C蛋白酶活性以及蛋白酶相关抑制剂活性,最终形成脊髓灰质炎病毒蛋白酶抑制剂筛选及药效评价平台。本发明能有效克服其他蛋白酶抑制剂筛选及活性评价方法的缺点,同时能够避免使用脊髓灰质炎病毒活病毒引发的安全性顾虑,对生物安全等级要求低,BSL‑1级实验室即可满足实验要求,是高效、准确、稳定、高通量、可重复的用于脊髓灰质炎病毒蛋白酶抑制剂筛选及药效评价平台。

    一种活性牛乳铁蛋白肽的制备方法

    公开(公告)号:CN117004636A

    公开(公告)日:2023-11-07

    申请号:CN202211486725.7

    申请日:2022-11-24

    Abstract: 本发明公开了一种活性牛乳铁蛋白肽的制备方法,本方法基于蛋白酶SMP能特异识别并切割标签蛋白SUMO,从而释放具有活性的牛乳铁蛋白肽。将标签蛋白SUMO与抗菌肽基因BLfcin融合到pGAPZα载体中,转化酵母SMD1168,获得新的酵母细胞系YAP,分泌表达获得抗菌肽的融合蛋白SUMO‑BLfcin;将SUMO蛋白酶基因SMP融合pGAPZα载体中,转化酵母SMD1168,获得新的酵母细胞系YSMP,分泌表达蛋白酶SMP;新酵母细胞系YAP与YSMP经分别发酵后,将YSMP的发酵液与YAP发酵液按一定比列混合即可获得预期的活性牛乳铁蛋白肽。该发酵生产方法可以获得预期的活性牛乳铁蛋白肽肽,且成本低廉,纯化简单,表达量高,生产安全,应用方便。

    一种耐盐的RPK突变体及其应用

    公开(公告)号:CN113913413B

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202110918233.X

    申请日:2021-08-11

    Inventor: 刘晓 赵致

    Abstract: 本发明提供了一种耐盐的RPK突变体及其应用。本发明人发现蛋白酶K的一些位点与其耐盐性及稳定性密切相关,在此基础上开发了一种蛋白酶K突变体,与野生型相比,所述突变体的耐盐性及稳定性更好。本发明也提供了优化的表达重组蛋白酶K突变体的方法,其产量高、生产成本低、适合规模化生产。

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